Các giá trị đối với niacin dùng phương án C, thủy phân bằng axit và kiềm là:

Ngũ cốc ăn liền

 = 23,92 mg/100 g

r = 2,29 mg/100 g

Ngũ cốc có socola

 = 16,98 mg/100 g

r = 2,24 mg/100 g

Sữa bột           

...

...

...

r = 0,92 mg/100 g

Nước quả

 = 4,31 mg/100 g

r = 0,49 mg/100 g

Đậu Hà Lan đông khô với dăm bông

 = 12,89 mg/100 g

r = 1,78 mg/100 g

Xúp đông khô

 = 11,06 mg/100 g

...

...

...

8.3 Độ tái lập

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử riêng rẽ, thu được bởi hai phòng thí nghiệm khi tiến hành trên vật liệu thử giống hệt nhau, không quá 5 % các trường hợp vượt quá giới hạn tái lập R.

Các giá trị đối với niacin dùng phương án A, thủy phân bằng axit là:

Sữa bột           

 = 16,66 mg/100 g

r = 2,04 mg/100 g

Ngũ cốc có socola

 = 21,03 mg/100 g

r = 2,55 mg/100 g

...

...

...

 = 16,91 mg/100 g

r = 1,75 mg/100 g

Bột mì

 = 0,72 mg/100 g

r = 0,59 mg/100 g

Đậu Hà Lan

 = 5,91 mg/100 g

r = 3,68 mg/100 g

...

...

...

Sữa bột           

 = 17,08 mg/100 g

r = 2,07 mg/100 g

Ngũ cốc có socola

 = 21,24 mg/100 g

r = 3,08 mg/100 g

Dăm bông

 = 17,29 mg/100 g

r = 3,76 mg/100 g

...

...

...

 = 0,54 mg/100 g

r = 0,91 mg/100 g

Đậu Hà Lan

 = 5,79 mg/100 g

r = 1,96 mg/100 g

Các giá trị đối với niacin dùng phương án C, thủy phân bằng axit và kiềm là:

Ngũ cốc ăn liền

 = 23,92 mg/100 g

...

...

...

Ngũ cốc có socola

 = 16,98 mg/100 g

r = 7,02 mg/100 g

Sữa bột

 = 5,66 mg/100 g

r = 2,82 mg/100 g

Nước quả

 = 4,31 mg/100 g

r = 0,54 mg/100 g

...

...

...

 = 12,89 mg/100 g

r = 6,61 mg/100 g

Xúp đông khô

 = 11,06 mg/100 g

r = 3,51 mg/100 g

9 Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ các thông tin sau:

a) Mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử (loại mẫu, nguồn gốc xuất xứ, tên gọi);

b) Viện dẫn tiêu chuẩn này và phương án chiết được chọn;

...

...

...

d) Ngày nhận mẫu;

e) Ngày thử nghiệm;

f) Kết quả thu được và đơn vị biểu thị;

g) Chi tiết quan sát được trong khi thử nghiệm;

h) Mọi chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc tùy ý lựa chọn cùng với các có thể ảnh hưởng đến kết quả.

Phụ lục A

(Tham khảo)

Sắc kí đồ điển hình

...

...

...

CHÚ DẪN:

a axit nicotinic

b nicotinamid

Hình A.1 - Ví dụ về tách bằng HPLC đối với các chất chuẩn

nicotinamid và axit nicotinic có tạo dẫn xuất sau cột

Các điều kiện thực nghiệm nêu trong Hình A.1 là:

Pha tĩnh:           LiChrospher® 60 RP Select B, cỡ hạt 5 μm, kích thước 250 mm x 4,0 mm;

Pha động:         đệm phosphat (c = 0,07 mol/l), hydro peroxit (c = 0,075 mol/l), đồng sulfat (c = 5 x 10^-6 mol/l);

Tốc độ dòng:    1 ml/min

...

...

...

Detector:          huỳnh quang, bước sóng kích thích 322 nm và bước sóng phát xạ 380 nm;

Phụ lục B

(Tham khảo)

Dữ liệu về độ chụm đối với các phương án thủy phân bằng axit, enzym và axit/kiềm

Dữ liệu về độ chụm đối với phép xác định niacin thủy phân bằng axit (phương án lựa chọn A) và thủy phân bằng enzym (phương án lựa chọn B) được thiết lập năm 2002 phù hợp với TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) [10] từ phép thử cộng tác do AéRIAL (CRT: Centre de Ressources technologiques) và CGd'UMA (Commission Générale d'Unification des Méthodes d'Analyses) tổ chức, xem [1], được nêu trong Bảng B.1 và B.2.

Dữ liệu về độ chụm đối với phép xác định niacin bằng phương án lựa chọn C được thiết lập năm 1999 phù hợp với TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) [10] từ phép thử cộng tác của Pháp, do CGd'UMA tổ chức, xem [2]. Nghiên cứu này đưa ra thông tin thống kê nêu trong Bảng B.3.

Bảng B.1 - Dữ liệu về độ chụm khi thủy phân bằng axit

Mẫu

...

...

...

Ngũ cốc có socola (bổ sung vi chất)

Dăm bông (không bổ sung vi chất)

Bột mì (không bổ sung vi chất)

Đậu Hà Lan (không bổ sung vi chất)

Năm thử nghiệm

2002

2002

2002

2002

...

...

...

Số phòng thử nghiệm

12

12

12

12

12

Số lượng mẫu (lặp lại hai lần)

2

2

...

...

...

2

2

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi loại trừ các ngoại lệ

11

10

10

12

12

Số phòng thử nghiệm ngoại lệ

...

...

...

2

2

0

0

Số kết quả được chấp nhận

22

20

20

24

...

...

...

Giá trị trung bình  (mg/100 g)

16,66

21,03

16,91

0,72

5,91

Độ lệch chuẩn lặp lại S_r(mg/100 g)

0,46

0,24

...

...

...

0,028

0,33

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSD_r %

2,8

1,1

1,1

3,9

5,6

Giới hạn lặp lại, r (r = 2,8 x S_r) (mg/100 g)

...

...

...

0,68

0,53

0,079

0,93

Độ lệch chuẩn tái lập S_R (mg/100 g)

0,72

0,90

0,62

0,21

...

...

...

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSD_R, %

4,3

4,3

3,7

29,2

22,0

Giới hạn tái lập, R (R = 2,8 x S_R) (μg/100 g)

2,04

2,55

...

...

...

0,59

3,68

Giá trị Horrat [8]

0,6

0,6

0,5

2,5

2,5

Bảng B.2 - Dữ liệu về độ chụm khi thủy phân bằng enzym

...

...

...

Sữa bột (bổ sung vi chất)

Ngũ cốc có socola (bổ sung vi chất)

Dăm bông (không bổ sung vi chất)

Bột mì (không bổ sung vi chất)

Đậu Hà Lan (không bổ sung vi chất)

Năm thử nghiệm

2002

2002

2002

...

...

...

2002

Số phòng thử nghiệm

12

12

12

12

12

Số lượng mẫu (lặp lại hai lần)

2

...

...

...

2

2

2

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi loại trừ các ngoại lệ

11

10

11

12

12

...

...

...

1

2

1

0

0

Số kết quả được chấp nhận

22

20

22

...

...

...

24

Giá trị trung bình  (mg/100 g)

17,08

21,24

17,29

0,54

5,79

Độ lệch chuẩn lặp lại S_r(mg/100 g)

0,49

...

...

...

0,25

0,014

0,12

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSD_r %

2,9

2,9

1,4

2,6

2,0

...

...

...

1,39

1,75

0,70

0,040

0,33

Độ lệch chuẩn tái lập S_R (mg/100 g)

0,73

1,09

1,33

...

...

...

0,69

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSD_R, %

4,3

5,1

7,7

59,2

11,9

Giới hạn tái lập, R (R = 2,8 x S_R) (μg/100 g)

2,07

...

...

...

3,76

0,91

1,96

Giá trị Horrat [8]

0,6

0,7

1,0

4,8

1,4

...

...

...

Mẫu

Bột ngũ cốc ăn liền (bổ sung vi chất)

Ngũ cốc có socola (bổ sung vi chất)

Sữa bột (không bổ sung vi chất)

Nước quả (bổ sung vi chất)

Đậu Hà Lan đông khô với dăm bông (không bổ sung vi chất)

Xúp đông khô (không bổ sung vi chất)

Năm thử nghiệm

1999

...

...

...

1999

1999

1999

1999

Số phòng thử nghiệm

11

11

11

10

...

...

...

10

Số lượng mẫu (lặp lại hai lần)

2

2

2

2

2

2

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi loại trừ các ngoại lệ

...

...

...

11

9

8

10

10

Số phòng thử nghiệm ngoại lệ

1

0

2

...

...

...

0

0

Số kết quả được chấp nhận

20

22

18

16

20

20

...

...

...

23,92

16,98

5,66

4,31

12,89

11,06

Độ lệch chuẩn lặp lại S_r(mg/100 g)

0,81

0,79

...

...

...

0,17

0,63

0,19

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSD_r %

3,4

4,7

5,7

4,0

4,9

...

...

...

Giới hạn lặp lại, r (r = 2,8 x S_r) (mg/100 g)

2,29

2,24

0,92

0,49

1,78

0,53

Độ lệch chuẩn tái lập S_R (mg/100 g)

4,11

...

...

...

0,99

0,19

2,34

1,24

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSD_R, %

17,2

14,6

17,6

4,5

...

...

...

11,2

Giới hạn tái lập, R (R = 2,8 x S_R) (μg/100 g)

11,65

7,02

2,82

0,54

6,61

3,51

Giá trị Horrat [8]

...

...

...

2,0

2,0

0,5

2,4

1,4

Phụ lục C

(Tham khảo)

So sánh giữa ba phương án thủy phân khác nhau

...

...

...

Bảng  C.1 - So sánh về niacin tổng số thu được thủy phân theo ba phương án khác nhau

Mẫu

A (mg/100 g)

B (mg/100 g)

C (mg/100 g)

Thực phẩm không bổ sung vi chất

...

...

...

51,6

57,8

43,0

Dăm bông

16,9

17,1

Bột lòng đỏ trứng

0,05

...

...

...

0,26

Đậu Hà Lan 1

7,2

6,4

8,7

Đậu Hà Lan 2

5,9

5,7

...

...

...

0,8

0,5

2,4

Bột mì 2

0,7

0,5

Nấm men bia khô

13,9

...

...

...

17,7

Gạo 1

1,3

1,3

3,6

Gạo 2

0,4

0,3

3,2

...

...

...

1,1

1,1

3,7

Thực phẩm bổ sung vi chất

Bột socola 1

2,1

...

...

...

1,2

Bột socola 2

0,4

0,8

0,7

Sữa bột 1

8,2

7,9

9,3

...

...

...

16,7

17,1

Sữa bột 3

4,2

4,3

3,5

Nước quả

0,3

...

...

...

0,3

Ngũ cốc ăn liền 1

20,0

19,6

19,0

Ngũ cốc ăn liền 2

21,0

21,2

...

...

...

21,9

20,7

19,9

Ngũ cốc ăn liền 4

12,5

12,3

12,0

Ngũ cốc ăn liền 5

16,1

...

...

...

16,5

Ngũ cốc ăn liền 6

15,4

15,6

15,2

Bột dành cho trẻ sơ sinh

4,0

4,3

4,7

...

...

...

15,4

16,4

15,4

Bột chứa hàm lượng protein cao 1

9,4

11,4

9,7

Bột chứa hàm lượng protein cao 2

10,7

...

...

...

9,0

Bột chứa hàm lượng protein cao 3

10,5

10,0

10,8

Bột thay thế

15,7

15,4

13,5

...

...

...

2 004

2 197

2 203

Thực phẩm bổ sung 2

487

505

493

Thực phẩm bổ sung 3

2 236

...

...

...

2 199

Thực phẩm bổ sung 4

1 044

1 201

1 112

Thực phẩm bổ sung 5

47,5

47,4

45,7

...

...

...

THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO

[1] To be published: Bergantzlé M., Validation study on the determination of niacin by BPLC in several matrices

[2] Lahély S., Bergantzlé M., Hasselmann, C.: Fluorimetric determination of niacin in foods by high-performance liquid chromatography with post-column derivatization, Food chem., 65, 129-133 (1999)

[3] Carter Ε.G.A. & Carpenter K.J.: The availabe niacin values of foods for rats and their relation to analytical  values. Journal of Nutrition, 112, 2091-2103 (1982)

[4] Carter Ε.G.A. & Carpenter K.J.: The bioavaibility for humans of bound niacin from wheat bran. American Journal of Clinical Nutrition, 36, 855-861 (1982)

[5] Van Niekerk Ρ.J., Smit C.C.S., Strydom, S.P., and Ambruster, G.: Comparison of a high-performance liquid chromatographic and microbiological method for the determination of niacin in foods. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 32, 304-307 (1984)

[6] UV and IR specktren wichtiger pharmazeutisher Wirkstoffe, Hans Werner Dibbern, Edition Cantor Aulendorg, 1978

[7] Mawatari, K., linuma, F., Watanabe, M.: Determination of nicotinic acid and nicotinamide in human serum by high-performance liquid chromatography with post-column ultraviolet irradiation and fluorescene detection, Anal. Sci., 7, 733-736 (1991)

[8] Horwitz, W.: Evaluation of Analytical Methods used for Regulation of Foods and Drugs, Anal. Chem.1982, 54 (1), 67A-76A

...

...

...

[10] TCVN 6910-2 (ISO 5725-2) Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp đo và kết quả đo - Phần 2: Phương pháp cơ bản xác định độ lặp và độ tái lập của phương pháp đo tiêu chuẩn.