Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 6831-2:2001 (ISO 11348-2 : 1998) về chất lượng nước - xác định ảnh hưởng ức chế của mẫu nước đến sự phát quang của vi khuẩn Vibrio fischeri (phép thử vi khuẩn phát quang) - phần 2 - phương pháp sử dụng vi khuẩn khô-lỏng do Bộ Khoa học Công nghệ và Môi trường ban hành

902955

Giáo dục

- {{m.title}}

Thuế

- {{m.title}}

- {{m.title}}

LawNet .vn

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 6831-2:2001 (ISO 11348-2 : 1998) về chất lượng nước - xác định ảnh hưởng ức chế của mẫu nước đến sự phát quang của vi khuẩn Vibrio fischeri (phép thử vi khuẩn phát quang) - phần 2 - phương pháp sử dụng vi khuẩn khô-lỏng do Bộ Khoa học Công nghệ và Môi trường ban hành

Số hiệu:	TCVN6831-2:2001	Loại văn bản:	Tiêu chuẩn Việt Nam
Nơi ban hành:	Bộ Khoa học Công nghệ và Môi trường	Người ký:	***
Ngày ban hành:	01/01/2001	Ngày hiệu lực:	Đã biết
Ngày công báo:	Đang cập nhật	Số công báo:	Đang cập nhật
		Tình trạng:	Đã biết

Số hiệu:	TCVN6831-2:2001
Loại văn bản:	Tiêu chuẩn Việt Nam
Nơi ban hành:	Bộ Khoa học Công nghệ và Môi trường
Người ký:	***
Ngày ban hành:	01/01/2001
Ngày hiệu lực:	Đã biết
Ngày công báo:	Đang cập nhật
Số công báo:	Đang cập nhật
Tình trạng:	Đã biết

Thí nghiệm kiểm tra
Thử nghiệm		Giá trị đo được l₀ l_k30 ²⁾				l_k30/l₀				Thử nghiệm tính đúng đắn Độ lệch so với giá trị trung bình , tính bằng % ³⁾
80% ¹⁾		297 292		242 236		0,8148 0,8082		0,8115		± 0,4
50% ¹⁾		295 305		253 257		0,8576 0,8426		0,8501		± 0,9
Thí nghiệm thử
Thử	Mức pha loãng D		Giá trị đo được l₀ l_T30 ²⁾			l_c30	H₃₀ %		%		Thử nghiệm tính đúng đắn Độ lệch so với giá trị trung bình, tính bằng % ⁴⁾	Г30
80% ¹⁾
1 2	1		300 297		81 85	243,5 241,0	66,7 64,7		65,7		± 1,0	1,919
50% ¹⁾
3 4 5 6 7 8	2 3 4		280 292 292 285 303 302		141 140 193 185 229 225	238,0 248,2 248,2 242,3 257,6 256,7	40,8 43,6 22,3 23,6 11,1 12,4		42,2 22,95 11,75		± 1,4 ± 0,65 ± 0,65	0,731 0,298 0,113
1) Thể tích của huyền phù thử : tương ứng 0,2 ml và 0,5 ml . 2) Thể tích cuối cùng trong cuvet: 1 ml. 3) Độ lệch của giá trị f_k30 , tính bằng phần trăm của các lần xác định song song so với giá trị trung bình của chúng là số đo sự phân tán của các mẫu kiểm tra. 4) Độ lệch của giá trị H₃₀ , tính bằng phần trăm của các lần xác định song song so với giá trị trung bình của chúng là số đo sự phân tán của các mẫu thử. Giá trị LID trong thí dụ này = 4. Giá trị EC₂₀ trong thí dụ này = 31,9 %, Giá trị EC₅₀ = 58,7 %.

11 Chuẩn cứ của tính đúng đắn

Phép thử được coi là đúng nếu :

- giá trị f_kt khi ủ trong 30 phút nằm trong phạm vi từ 0,6 đến 1,8;

- kết quả xác định song song không chênh lệch quá 3% so với trung bình của chúng. Điều này đúng cho mẫu kiểm tra, cũng như mẫu thử khi xác định giá trị LID hoặc các giá trị EC₂₀ và EC₅₀ tương ứng;

- Cả ba chất đối chứng (5.6) gây ức chế từ 20% đến 80% sau thời gian tiếp xúc 30 phút ở các nồng độ sau (các dung dịch không được trung hoà, kiểm tra riêng rẽ):

3,5-diclorophenol 6 mg/l

Zn²⁺ (là kẽm sunfat ngậm 7 nước) 25 mg/l

Cr⁶⁺ (là kali dicromat) 4 mg/l

...

Bạn phải đăng nhập hoặc đăng ký Thành Viên TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.

Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66

Trong một thử nghiệm liên phòng thí nghiệm quốc gia được tiến hành trong suốt mùa hè năm 1991 do 22 phòng thí nghiệm tham gia đã xác định các số liệu về độ chính xác. Các kết quả được nêu trong phụ lục C.

13 Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải nêu trích dẫn của tiêu chuẩn và phần đã sử dụng [TCVN 6831-1 : 2001 (ISO 11348-1); TCVN 6831-2 : 2001 (ISO 11348-2) hay TCVN 6831-3 : 2001 (ISO 11348-3)] và gồm các thông tin sau:

a) nhận biết mẫu nước, kể cả việc lấy mẫu, thời gian và điều kiện bảo quản;

b) pH của mẫu nước gốc;

c) ngày thử nghiệm;

d) xử lý sơ bộ mẫu, nếu có;

e) nguồn gốc vi khuẩn, số mẻ;

f) ngày chuẩn bị vi khuẩn;

...

h) biểu thị kết quả theo điều 10 và bảng 1;

i) những sai lệch so với phương pháp này và thông tin về các tình huống có thể ảnh hưởng đến kết quả;

j) kết quả thử với các chất đối chứng.

Phụ lục A

(tham khảo)

PHƯƠNG PHÁP CHỈNH MÀU

A.1 Phạm vi áp dụng

Việc giảm độ phát quang do hấp thụ ánh sáng có thể xẩy ra khi mẫu trong các dãy pha loãng thấy rõ màu, đặc biệt những màu từ đỏ đến nâu. Nếu quan sát thấy màu ở nồng độ EC20, thì nên thực hiện qui trình sau đây để kiểm tra nếu thấy cần thiết phải hiệu chỉnh màu. Trong mọi trường hợp, khi nồng độ của mẫu thử gần với giá trị EC50 thì nên hiệu chỉnh màu.

A.2 Dụng cụ bổ sung

...

A.3 Cách tiến hành

Thực hiện toàn bộ qui trình hiệu chỉnh màu ở nhiệt độ 15 ⁰C ± 0,5 ⁰C trong tủ ấm kiểm soát được nhiệt độ. Chuẩn bị một dung dịch mẫu thử có nồng độ gần giá trị EC_20,t (Ck). Khi các giá trị EC_20,t chênh lệch lớn thì Ck phải gần với giá trị EC_20,t thấp nhất.

Chú thích - Không cần phải chọn C_k khác nhau cho mỗi khoảng thời gian tiếp xúc (5 phút, 15 phút, 30 phút).

Cho 2,0 ml dung dịch natri clorua 2% vào khoang ngoài của cuvet hiệu chỉnh màu. Chuẩn bị huyền phù vi khuẩn đặc biệt.

Trộn kỹ huyền phù trước khi dùng pipet Paster để chuyển vào khoang trong của cuvet hiệu chỉnh màu.

Thêm huyền phù cho bằng với mức dung dịch có trong khoang ngoài của cuvet hiệu chỉnh màu. Đo mức ánh sáng (B₀) sau ít nhất 15 phút, và khởi động đồng hồ bấm giờ.

Từ thời điểm này trở đi, vị trí của cuvet hiệu chỉnh màu trong khoang đo phải được giữ nguyên cho tất cả các số đọc.

Dùng pipet lấy hết dung dịch natri clorua từ khoang ngoài và thay vào đó bằng 2,0 ml mẫu thử đã pha loãng (phụ lục B) và làm lạnh sơ bộ đến 15 ⁰C ± 1 ⁰C.

Sau lần đo đầu 5 phút, đo mức ánh sáng (l₅).

...

Chú thích - Qui trình này có thể đơn giản hoá bằng cách dùng 2 cuvet hiệu chỉnh màu giống hệt nhau. Khoang ngoài của cuvet thứ nhất chứa đầy nước pha loãng, khoang ngoài của cuvet thứ hai chứa đầy mẫu đã pha loãng. Sau 15 phút, có thể đo mức ánh sáng B₀ và l₀. Những giá trị này có thể thay cho các giá trị B5 và l5 khi tính toán trong A.4.

A.4 Tính toán kết quả

Việc tính này thừa nhận rằng mẫu màu phù hợp với định luật Beer-Lambert, đó là trường hợp thông thường.

Tính B₅ theo công thức:

Tính độ hấp thụ (A_t) của nồng độ EC_20,t chưa hiệu chỉnh với thời gian tiếp xúc (t) theo công thức:

trong đó

C_k là nồng độ của mẫu hoặc của hoá chất có trong nồng độ thử (màu);

...

là độ hấp thụ của dung dịch pha loãng cần thử trong cuvet hiệu chỉnh màu.

Tính độ truyền qua tương ứng (T_t) theo công thức:

Tính những giá trị gamma đã hiệu chỉnh (Ãc) theo công thức:

và

trong đó

cГ_t là hệ số hiệu chỉnh cho giá trị gamma ở thời gian tiếp xúc đã định (t);

...

Tiến hành tính lại kết quả thử với giá trị gamma đã được hiệu chỉnh.

Chú thích - ở thời gian tiếp xúc đã định, độ hấp thụ (A_t) và độ truyền qua (T_t) đối với mỗi nồng độ thử đều có thể tính được, và từ đó tính được giá trị gamma chưa hiệu chỉnh theo công thức:

Hệ số hiệu chỉnh là giống nhau đối với từng giá trị gamma, khi thừa nhận độ dốc của đồ thị gốc là đúng. Do đó, điều này đủ để tính hệ số hiệu chỉnh chỉ đối với 1 giá trị gamma. Trong phép tính này, áp dụng giá trị gamma tương ứng với nồng độ EC_20,t chưa hiệu chỉnh (Г = 0,25). Công thức tính hệ số hiệu chỉnh được rút gọn như sau:

trong đó

C là nồng độ của mẫu;

l_t là giá trị phát quang sinh học đo được ở thời gian tiếp xúc đã định (t);

cГ_t là hệ số hiệu chỉnh cho các giá trị gamma ở thời gian tiếp xúc đã định (t);

...

Г_c là giá trị gamma đã được hiệu chỉnh.

A.5 Thí dụ

Số liệu chỉnh màu

C_k = 10,0% phần thể tích

B₅ = 81

l₅ = 78

k = 3,1

Tính toán hiệu chỉnh màu

C_k = % phần thể tích

...

15 phút

30 phút

cГ₅ = 0,708 cГ₁₅ = 0,670 cГ₃₀ = 0,657

l₀

l₅

Г₀

Г_c

l₁₅

...

Г_c

l₃₀

Г₀

Г_c

mẫu trắng

100

...

5,625

0,076

...

0,059

0,040

0,055

0,036

11,250

...

0,243

0,253

0,170

0,242

0,159

22,500

...

0,920

0,651

0,829

0,556

0,768

0,505

45,000

...

4,820

3,412

3,565

2,389

2,994

1,967

...

Công thức đã chỉnh

lnГ= 1,96 x ln C - 5,96

lnГ= 1,96 x ln C - 6,30

lnГ= 1,95 x ln C - 6,16

lnГ= 1,95 x ln C - 6,56

nГ= 1,90 x ln C - 6,12

nГ= 1,90 x ln C - 6,53

EC_30,t gốc

EC_30,t đã hiệu chỉnh

...

12,3

11,6

14,3

12,1

15,1

Phụ lục B

(tham khảo)

MỨC PHA LOÃNG D - CHUẨN BỊ CÁC DÃY PHA LOÃNG

...

Trong phép thử vi khuẩn phát quang, thường trộn các thể tích huyền phù thử đúng bằng với thể tích của mẫu nước hoặc thể tích của mẫu đã pha loãng. Do đó, các mức pha loãng trong các dãy pha loãng thường D ≥ 2. Nếu cần thử mẫu nước gần như không pha loãng, thì có thể thêm 800 μl mẫu nước vào 200 μl huyền phù thử. Độ pha loãng khi đó là 1:1,25. Giá trị D tương ứng có thể được coi là D =1. Đối với giá trị D này, cần có thêm một mẻ kiểm tra được tiến hành bằng cách thêm 800 μl dung dịch natri clorua vào 200 μl huyền phù thử.

Để chuẩn bị các dãy pha loãng nên tiến hành theo bảng B.1.

Bảng B.1 - Chuẩn bị dãy pha loãng - Thành phần của mẻ thử và mẻ kiểm tra

Pha loãng

Mức pha loãng D

Mẫu nước

μl

Nước pha loãng

μl

...

Huyền phù gốc

μl

(8.4)

1 trong 1,25

800

200

1 trong 2

...

500

1 trong 3

333,3

166,7

500

1 trong 4

...

250

500

1 trong 6

166,7

333,3

500

1 trong 8

...

125

375

500

1 trong 12

83,3

416,7

500

1 trong 16

...

62,5

437,5

500

1 trong 24

41,7

458,3

500

1 trong 32

...

31,3

468,7

500

Mẻ kiểm tra với

D = 1

với D ≥ 2

...

800

500

200

500

Giá trị D thấp nhất mà khi đó ảnh hưởng ức chế H₁ < 20% được gọi là LID.

Phụ lục C

(tham khảo)

...

Các dung dịch 3,5-diclorophenol, kẽm sunfat ngậm 7 nước, kali dicromat và xetyl-trimethyl-ammonium bromua chưa trung hoà, được chuẩn bị bằng nước cất hoặc nước có độ tinh khiết tương đương được dùng cho thử nghiệm liên phòng thí nghiệm. Những giá trị EC được xác định theo mô tả trong 9.2.

Các chữ viết tắt trong các bảng C.1 biểu thị:

L: Số lượng phòng thí nghiệm tham gia

N: Số lượng các bộ dữ liệu

NAP: Số lượng ngoại lệ, tính bằng phần trăm

s_R: Độ lệch chuẩn của độ tái lập

: Giá trị trung bình

CV_R: Hệ số biến thiên của độ tái lập, tính bằng phần trăm

EC₂₀, EC₅₀: Nồng độ hữu hiệu gây ra ức chế phát quang 20% hoặc 50 % tương ứng.

...

Bảng C.1 - Số liệu về độ chính xác đối với vi khuẩn khô - lỏng

L =N

NAP

mg/l

s_R

mg/l

...

1. 3,5-diclorophenol

EC₂₀

EC₅₀

4,8

...

4,69

7,61

1,03

1,31

22,0

17,2

...

EC₂₀

EC₅₀

5,0

0,0

...

26,3

3,6

6,1

23,8

23,2

3. Kali dicromat ¹⁾

EC₂₀

...

0,0

0,5

1,22

3,50

...

0,5

1,15

46,2

32,8

4.xetyl-trimetyl-ammoni bromua

EC₂₀

EC₅₀

...

0,0

5,9

0,745

1,199

0,416

...

55,9

28,9

¹⁾ Nồng độ Zn²⁺ hoặc Cr⁶⁺ tương ứng.

{{m.Name}} {{m.Name}}

Văn bản gốc
(Không có nội dung)

Bạn Chưa Đăng Nhập Tài khoản!

Vì chưa Đăng Nhập nên Bạn chỉ xem được Thuộc tính của Văn bản. Bạn chưa xem được Hiệu lực của Văn bản, Văn bản Liên quan, Văn bản thay thế, Văn bản gốc, Văn bản tiếng Anh,...

Nếu chưa có Tài khoản, mời Bạn Đăng ký Tài khoản tại đây

Văn bản tiếng Anh
(Không có nội dung)

LawNet .vn

Không có nội dung

Ban hành: {{m.News_Dates_Date}}

Hiệu lực: {{m.News_EffectDate_Date}}

Tình trạng: {{m.TinhTrang}}

Cập nhật: {{m.Email_SendDate_Date}}

Ban hành: {{m.News_Dates_Date}}

Hiệu lực: {{m.News_EffectDate_Date}}

Tình trạng: {{m.TinhTrang}}

Cập nhật: {{m.Email_SendDate_Date}}

LawNet .vn

Không có nội dung

Ban hành: {{m.News_Dates_Date}}

Hiệu lực: {{m.News_EffectDate_Date}}

Tình trạng: {{m.TinhTrang}}

Cập nhật: {{m.Email_SendDate_Date}}

Ban hành: {{m.News_Dates_Date}}

Hiệu lực: {{m.News_EffectDate_Date}}

Tình trạng: {{m.TinhTrang}}

Cập nhật: {{m.Email_SendDate_Date}}

LawNet .vn

{{m.Name}} {{m.Name}}

Tra cứu nhanh

Từ khóa

{{m}},

Địa chỉ:	19 Nguyễn Gia Thiều, Phường Võ Thị Sáu, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
Điện thoại:	(028) 7302 2286 (6 lines)
E-mail:	info@lawnet.vn